Что такое иммуногистохимия

Иммуногистохимическое исследование эндометрия — это сложная процедура, позволяющая глубоко изучить слизистую матки и поставить точный диагноз. Метод включает два обследования: иммунологическое и гистологическое. Исследуется структура эндометрия, выявляются антитела и возбудители. Результаты позволяют установить наличие клеток, препятствующих зачатию, и их количество.

Иммуногистохимический анализ оценивает чувствительность рецепторов детородного органа к гормональной стимуляции во время овуляции и при лечении гормональными препаратами перед ЭКО. Исследование проводится, когда женщина здорова, гормональный фон и состояние эндометрия в норме, антиспермальные антитела отсутствуют, но беременность невозможна. Проблема может заключаться в том, что маточный слой не воспринимает гормональное воздействие, не обновляется и не утолщается.

Суть и возможности метода

При онкологическом процессе в кровь попадают антигены, указывающие на патологию и локализацию новообразования. Это позволяет точнее поставить диагноз и оценить эффективность лечения.

Исследование направлено на выявление антигенов с помощью тестов, в которых используются реактивы с «мечеными» антителами. Эти белковые структуры окрашены специализированными красителями.

Антитела находят антигены и связываются с ними. Эта реакция называется «антиген-антитело», и с помощью меченых клеток можно определить наличие антигенов, свидетельствующих о злокачественном процессе.

Иммуногистохимическое исследование позволяет выявить не только онкогенные маркеры, но и рецепторы к гормонам, что важно при гормонозависимых опухолях и прогрессирующих эндокринных заболеваниях.

Результаты исследования показывают:

1. Гистологическую принадлежность опухоли, подтверждая или опровергая наличие рака.
2. Локализацию опухолевого процесса и органы-мишени, что позволяет направить лечение на конкретный участок тела.
3. Возможные методики лечения и резистентность клеток к определённым медикаментам, что помогает врачу прогнозировать эффективность препаратов и минимизировать риски побочных эффектов.

Иммуногистохимия — это наиболее достоверное исследование для определения типа раковых клеток с минимальной погрешностью.

Её основное преимущество — точное выявление типа рака и места его локализации, что невозможно с помощью других методов. Окрашивание образца биоматериала показывает, какие клетки присутствуют в опухоли и как они реагируют на лечение.

Диагностика, основанная на химической реакции, помогает выявить опухолевый процесс на ранних стадиях, увеличивая шансы на благоприятный исход.

На точность результатов влияют внешние факторы, включая прием гормональных препаратов. За несколько дней до биопсии рекомендуется отказаться от всех лекарств, соблюдать диету и избегать физических нагрузок. Невыполнение этих рекомендаций может привести к неточностям в результатах. Для повышения надежности анализа можно сдать его в двух лабораториях одновременно.

Другие маркерные методы

Онкологический диагноз редко устанавливают на основе одного исследования.

Гистологический

Второй информативный анализ — гистология. Этот метод отличается от иммуногистохимии тем, что предоставляет информацию только о клеточном строении. Гистологический анализ позволяет выделить несколько различных структур в одном образце, например, аденокарциномы. Это злокачественное образование формируется из железистой ткани, выделяющей жидкость. В зависимости от типа жидкости различают серозную и слизисто-секреторную. Клетки аденокарцином могут располагаться фолликулярно или папиллярно. Опухоль может быть твердой или содержать цистные включения, что классифицирует её как цистаденокарциному. Эти характеристики определяются по результатам гистологического исследования, что позволяет корректировать лечение в зависимости от типа опухоли.

Технология проведения гистологического анализа аналогична иммуногистохимии. Сначала берут материал с помощью биопсии, затем покрывают его парафином и нарезают на тонкие пластины. Готовые препараты окрашивают, после чего патоморфолог изучает их под микроскопом.

Недостатки гистологического исследования включают длительные сроки ожидания результатов планового анализа — 10-14 дней. Срочный анализ выполняется за 30 минут.

Метод МГМ

Ещё один метод анализа — молекулярно-генетический. Он позволяет выявить отклонения в ДНК злокачественной опухоли, которые влияют на её метастатическую и инвазивную активность, а также определить наличие наследственной или спорадической предрасположенности к образованию опухоли.

Гистология и иммуногистохимия — два основных метода диагностики рака, которые подтверждают друг друга. Разница в результатах встречается редко, так как иммуногистохимия исследует клеточное строение.

После гистологического исследования лимфоузла пациента часто направляют на иммуногистохимию. Эксперт под микроскопом изучает материал, и в некоторых случаях может что-то упустить или столкнуться с трудностями в идентификации структуры. Метод ИГХ служит поддержкой в спорных ситуациях.

Игх при раке молочной железы: исследование игх при онкологии молочной железы, типы рака молочной железы по игх

ИГХ при раке молочной железы — важный инструмент современной онкологии, позволяющий подобрать оптимальное противоопухолевое лечение.

Иммуногистохимический анализ (ИГХ) основан на способности иммунной системы синтезировать вещества, нейтрализующие инородные агенты — бактерии, вирусы и токсины. Эти агенты, называемые антигенами, вызывают выработку специфических антител.

Рак молочной железы может скрываться от иммунного ответа, но ИГХ позволяет выявить антитела к раковым клеткам и их структурным элементам.

В процессе ИГХ образец опухоли обрабатывают реагентами с антигенами, которые связываются с соответствующими антителами, изменяя окраску ткани.

ИГХ используется не для научных исследований, а для практических целей:

1. Обнаружение рецепторов половых гормонов (эстрогенов и прогестерона) предсказывает более благоприятное течение рака с меньшей вероятностью метастазирования и большей продолжительностью жизни.
2. Разные уровни эстрогенов и прогестеронов помогают выбрать оптимальное лечение. Высокий уровень эстрогенов в сочетании с прогестероном может обеспечить хороший результат гормональной терапии, в то время как отсутствие рецепторов требует химиотерапии.
3. Высокая концентрация рецептора HER2 указывает на агрессивность рака и необходимость химиотерапии и специфического нейтрализатора HER2.
4. Позитивный гормональный статус в сочетании с HER2 вызывает сомнения в эффективности гормонотерапии, поэтому в лечение включается химиотерапия.
5. Высокий уровень Ki-67 свидетельствует о высокой степени злокачественности и также требует химиотерапии.

Основное показание для ИГХ при раке молочной железы — определение агрессивности опухоли для подбора оптимального лечения.

Обычный морфологический анализ (гистология) показывает степень злокачественности и клеточный состав опухоли, но не позволяет определить белковые структуры:

• Чувствительность клеток к лекарствам зависит от наличия рецепторов половых гормонов.
• Активность клеточного размножения контролируется белком HER2; его избыток ускоряет рост рака и формирует защиту от лекарств.
• Способность клеток быстро воспроизводить замену погибшим определяет маркер пролиферации Ki-67.

ИГХ проводится на образце опухоли вне организма. Всем женщинам с впервые обнаруженным новообразованием в молочной железе выполняется кор-биопсия.

Полученный образец ткани проходит гистологическое и ИГХ исследование, что позволяет подтвердить наличие рака и спланировать лечение. Удалённая опухоль также подвергается этим исследованиям для уточнения плана терапии.

Перед биопсией женщине нужно просто успокоиться, специальная подготовка не требуется.

Обнаружение рецепторов ЭР и ПР предсказывает более благоприятное течение и эффективность гормональных препаратов, хотя опухоль может не реагировать на эндокринную терапию, хотя процент устойчивости невысок.

Обнаружение Ki-67 указывает на необходимость интенсивного лечения с максимальными возможностями химиотерапии для улучшения прогноза.

Рецептор HER2 является прогностическим фактором, указывающим на необходимость химиотерапии без особых надежд на антигормональное воздействие, но также предсказывает необходимость использования таргетного препарата, связывающего патологический белок.

Проведение исследования

Проводится трепанобиопсия — забор ткани из предполагаемой опухоли. На груди женщины отмечается черная точка. Если была операция, иссеченный материал также подходит для исследования. Ткань проходит следующие этапы:

• отправляется в лабораторию;
• помещается в формалин;
• обезжиривается;
• заливается жидким парафином для получения блоков для гистологии;
• с блоков делают срезы толщиной 1 мм и помещают на специальные стекла;
• срезы окрашивают препаратами или антителами для иммуногистохимии;
• через 10-12 дней лаборанты интерпретируют результаты.

Исход благоприятен после терапии гормональными препаратами, если Ki-67, как показатель онкогенности, не превышает 15-17%. При значении 35% опухоль развивается стремительно, и приостановить ее можно только химиопрепаратами. Если Ki-67 превышает 85-95%, летальный исход вероятен практически в каждом случае.

Статус рака – HER2

Рецепторы HER2 на поверхности клеток функционируют как «антенны», улавливающие химические сигналы от организма. В норме рецепторы должны работать корректно, а клетки молочной железы — делиться и восстанавливаться в нужное время.

У многих женщин ген HER2 начинает давать сбой, что приводит к избыточной выработке рецепторов. В ответ на опасные сигналы клетки начинают бесконтрольно делиться и размножаться. Когда врачи говорят о статусе HER2 в иммуногистохимическом исследовании, это указывает на наличие рака молочной железы на начальной стадии.

При подозрении на рак у каждой женщины определяется статус опухоли. Это необходимо для назначения адекватной терапии. Статус может изменяться с положительного на отрицательный. Иммуногистохимия позволяет выявить степень онкогенных клеток в образце патологической ткани. При раке и карциноме молочной железы содержание рецептора или белка превышает норму, что приводит к неконтролируемому делению и росту клеток.

Расшифровка анализа

Исследуется структура ткани и количество атипичных антител, что поможет определить вид рака.

Интерпретацию анализа проводит онколог, который сообщает пациенту всю полученную информацию. В результате на бланке анализа обязательно указываются показатели Ki 67, отражающие степень озлокачествления опухоли. Также обследуется гормональный фон женщины, от которого зависит поведение новообразования, его прогрессирование и скорость появления метастазов.

Иммуногистохимическое обследование позволяет диагностировать стадию, форму и степень развития онкологии, после чего подбирается оптимальное лечение. Если гормональный фон в норме и опухоль неактивна, лечение может ограничиться назначением гормональных препаратов. При повышенной активности опухоли, то есть при увеличении показателей Ki 67, требуется назначение более сильных химических средств.

Клетки в здоровом организме должны восстанавливаться и нормально делиться. При позитивном HER2 рак будет прогрессировать, и опухоль будет быстро увеличиваться. Для подавления роста новообразования при положительном HER2 назначаются медикаменты (Герцептин, Лапатаниб). Если HER2 отрицательный, лечение будет иным — с использованием более эффективных химиопрепаратов.

ИГХ — сложный и многоступенчатый метод. Используется множество маркеров, и правильно расшифровать результаты иммуногистологических анализов могут только специалисты. Обычно при выявлении онкологии у женщин собирается консилиум врачей для более адекватного планирования и выбора тактики лечения.

ИГХ важен для врачей, чтобы выбрать правильную тактику лечения и дать прогнозы на будущее.

Положительные и отрицательные стороны

Преимущества метода:

• Минимальные затраты биоматериала и реактивов;
• Ранняя диагностика рака;
• Быстрый результат;
• Высокая точность и достоверность.

Дополнительное преимущество — возможность трехмерного моделирования. Ответная реакция на антитела проявляется через три часа, а окончательное заключение выдается через 7-10 дней. В этот срок точно определяются тип рака, стадия заболевания и первичный очаг. Изменение цвета маркеров обычно не вызывает разночтений при диагностике. На итоговом бланке представлена расшифровка результатов.

Достоверность зависит от метода окрашивания образца реактивами, который может выполняться автоматически или вручную. При ручном методе возможны ошибки из-за человеческого фактора. Лечащий врач подскажет, в какую лабораторию обратиться. Пациент также может узнать, как проводится анализ в конкретном учреждении. Для повышения достоверности результат можно получить повторно или в двух лабораториях.

Погрешности могут возникать из-за действий пациента. Перед биопсией следует прекратить прием гормональных препаратов и других лекарств, избегать физических нагрузок и соблюдать диету. Внешние факторы также могут влиять на результаты.

Расшифровка результатов

В результате анализа определяются показатели Ki-67 и статус HER2. Начнем с расшифровки Ki-67.

Ki-67 — это белок, используемый как онкомаркер при карциноме молочной железы. Он содержится в ядре клеток и в норме, но при онкозаболевании его уровень резко возрастает, особенно у пациентов с ER-положительным раком, где наблюдается повышенное содержание эстрогена. Чем выше уровень Ki-67 в процентах, тем хуже прогноз для пациента.

Статус HER2 проще интерпретировать: он может быть положительным или отрицательным. Положительный статус указывает на высокую концентрацию рецепторов HER2 в образце ткани, что связано с более агрессивным типом карциномы молочной железы. Лечение таких случаев требует препаратов, направленных на белок HER2.

Также в результатах исследования могут быть указаны статусы ER и PR. Аббревиатура ER+ означает наличие рака с преобладанием рецепторов эстрогена, а PR+ — с рецепторами прогестерона. Если после этих аббревиатур стоит “–”, это говорит о том, что в образце ткани нет карциномы с этими рецепторами.

Таким образом, выделим две разновидности рака молочной железы:

• С повышенной концентрацией рецепторов прогестерона или эстрогена (PR+ или ER+). Эти клетки называют гормонально-положительными.
• С преобладанием HER2 (HER2-положительный результат анализа).

У обоих подтипов уровень онкобелка Ki-67 в клетках выше нормы. Рассмотрим лечение для различных результатов ИГХ.

ER+ и PR+ рак лечат гормональной терапией, направленной на снижение соответствующего гормона в молочной железе. Этот вид заболевания легче поддается лечению, и ремиссия наступает в 95 % случаев при уровне Ki-67 менее 10 %. Однако существует риск рецидива через несколько лет после лечения.

Если анализ показывает HER2 +3, ER+ и PR+ одновременно, это называется тройной-позитивной опухолью. В таком случае сначала назначают препараты, направленные на белок HER2, а затем добавляют средства, снижающие уровень эстрогена и прогестерона.

Если результаты анализа отрицательны для HER2, ER и PR, но уровень Ki-67 выше 10 %, диагностируется более агрессивный рак. Чаще всего он встречается у женщин из Африки и Латинской Америки. Опухоль развивается быстро и может стать злокачественной, поэтому в этом случае требуется химиотерапия.

Гистология груди

Гистологический анализ ткани, полученной из опухоли груди, требует предварительной пропитки спиртами и парафином для возможности тонкой нарезки. Затем необходимо удалить парафин, окрасить образцы различными методами в зависимости от свойств опухоли и рассмотреть их под микроскопом, желательно у опытного специалиста.

Процесс занимает от 2 до 7 дней и зависит от оборудования, а также от того, будет ли запускаться весь агрегат для одного пациента или группы (для экономии реактивов). Также важно, будет ли привлечен опытный специалист, так как их осталось немного.

Ответ пункции

Неопытный специалист в гистологии даёт уклончивые ответы, чтобы избежать категоричности и конкретики. Он маскирует непрофессионализм фразами вроде: «Рекомендовано углублённое исследование…», «Материала недостаточно для…», «Достоверно судить о… не представляется возможным…». Опытный специалист использует такие обороты речи лишь 1-2 раза за свою карьеру.

Показания к проведению ИГХ

• Дифференциальная диагностика опухолей;
• Определение источника метастаза при неясном первичном очаге;
• Оценка гормонального статуса;
• Иммунофенотипирование опухолей;
• Определение факторов прогноза опухолевого процесса;
• Выбор схемы противоопухолевой терапии.

Этот тест также эффективен при проблемах с зачатием. Анализ иммуногистохимии эндометрия рекомендуется при следующих гинекологических заболеваниях и состояниях:

Иммуногистохимия при раке

По данным медицинской статистики, в 5-15% случаев злокачественные опухоли выявляются только по метастазам. Метастазы без установленного первичного очага имеют случайную локализацию и быстрое прогрессирование. Средняя продолжительность жизни пациентов с неясным первичным очагом и тремя и более метастатическими зонами составляет несколько месяцев. Своевременная иммуногистохимическая (ИГХ) диагностика помогает определить тактику лечения до выявления первичного очага. ИГХ-анализ, в зависимости от морфологического типа новообразования, уточняет клеточное строение опухоли и может указать на вероятную локализацию первичного очага.

Для диагностики первичных опухолей и их метастазов применяется широкий спектр маркеров. Определение направления роста опухолевых клеток и ряда биологических параметров опухоли служит основанием для назначения определенных схем терапии. Иммуногистохимию рака молочной железы или тканей другой локализации можно провести по направлению врача-онколога, так как диапазон значений индивидуален и зависит от анамнеза, проведенного или планируемого лечения и предполагаемого клинического диагноза.

Стоимость анализа

Цены на иммуногистохимическое исследование при раке молочной железы представлены в таблице ниже. Специалисты, проводящие ИГХ-тесты, имеют доступ ко всем необходимым антителам, что обеспечивает достоверность результатов. Набор и количество анализов зависят от нескольких факторов, включая локализацию образования и результаты гистологии, полученные при биопсии. Вся необходимая информация будет предоставлена вашим лечащим врачом. Сроки готовности анализа ИГХ составляют 7-10 дней.

Необходима диагностика образования в груди? Узнайте, как и где сделать кор-биопсию молочной железы.

Суть исследования

Иммуногистохимическое исследование (ИГХ) основано на взаимодействии антител с белковыми структурами и рецепторами раковых клеток. При наличии опухоли в молочной железе антитела, введенные в ткань, связываются с раковыми клетками и излучают свет определенной длины волны. Этот метод позволяет точно определить расположение основной опухоли и метастазов.

Наличие карциномы молочной железы определяется по рецепторам двух гормонов: эстрогена и прогестерона, а также уровню рецепторов HER2. HER2 активирует рост белков на мембране клеток эпидермиса. Увеличенное количество рецепторов HER2 в образце ткани указывает на развитие карциномы. Метод позволяет определить концентрацию рецепторов HER2, прогестерона, эстрогена и онкобелка Ki-67.

Оптимальное время для сдачи гистохимического анализа — это:

• 19-22 день при 28-дневном цикле.
• 23-26 день при 35-дневном цикле.

Сначала выполняется биопсия — взятие образца ткани опухоли. Обычно кусочек биоптата извлекается тонкой иглой, но в некоторых случаях материал берется во время хирургического вмешательства.

Процесс иммуногистохимии молочной железы включает следующие этапы:

1. Образец фиксируется в растворе формалина для предотвращения высыхания.
2. Подготовленный биоматериал отправляется на исследование.
3. Материал обезжиривается и заливается медицинским парафином.
4. Биоптат нарезается тонкими пластинками толщиной не более 1 мкм и помещается на медицинские стекла.
5. Образец окрашивается реактивами определенной концентрации.
6. Степень окраски зависит от количества определенных рецепторов: чем ярче цвет, тем больше рецепторов в образце.

Сроки выполнения анализа зависят от числа используемых маркеров:

• До 5 ферментов — в течение 7 дней.
• Более 5 маркеров — до 15 дней.
• Срочный результат — через 3 часа.

Лечение и прогноз миофибробластом молочной железы

• Единственный способ лечения миофибробластом молочной железы у женщин и мужчин — хирургическая резекция опухоли.
• При соблюдении всех правил удаления (с четкими краями резекции или идеальной степени резекции R0) риск местного рецидива маловероятен.
• По результатам наблюдения в течение 15 лет и более не зафиксировано отдаленных метастазов. Таким образом, рецидивирование и метастазирование миофибробластом молочной железы после местного иссечения не характерно.
• В некоторых случаях пациентам проводят радикальную операцию после тонкоигольной аспирационной цитологии, без других видов биопсии. Это затрудняет дифференциальную диагностику и может привести к ненужным хирургическим вмешательствам, что тяжело для пациентов. Поэтому мультидисциплинарный подход к диагностике имеет решающее значение. Необходимо избегать чрезмерного лечения, особенно подмышечной лимфодиссекции.
• Краткосрочный и долгосрочный прогноз хороший, даже отличный, при условии полного хирургического удаления по правилам R0, без дополнительных методов лечения, таких как лучевая или гормональная терапия.
• Злокачественная трансформация пока не зафиксирована, однако наблюдение должно продолжаться не менее 24 месяцев с частотой посещений раз в шесть месяцев.

Миофибробластома молочной железы — редкая опухоль, поражающая как пожилых мужчин, так и женщин, с множеством морфологических вариантов, что затрудняет ее дифференциальную диагностику.

Эта опухоль была выделена и изучена относительно недавно, а период послеоперационного наблюдения в целом невелик. Поэтому всем пациентам с миофибробластомой молочной железы, независимо от пола и возраста, рекомендуется индивидуально согласовать график послеоперационного наблюдения у маммолога-онколога, а также длительность и объем последующих обследований.